
微流控核酸扩增仪和实时荧光分析仪联合使用,可提供自动化、高通量、高性价比和简便易行的反应体系构建、核酸扩增和荧光信号检测功能,实现基因表达、基因分型定量、拷贝数变异分析和蛋白生物标志物检测等多种应用;
提取出的核酸需要加入试剂进行荧光扩增反应。利用荧光实时定量技术检测病毒载量,获取实验样本的检测结果。
生化分子实验室配备的仪器设备有:多功能酶标仪、超微量蛋白核酸分析仪、仪、实时荧光定量仪、化学发光荧光成像仪等。
点样,提取好的核酸需要加入试剂系统进行荧光扩增反应。通过荧光实时定量技术,检测病毒载量,最终获得实验样本的检测结果。(和试剂配置一样,点样已经被机械设备替代,不需要人工点样了,只用操作机器,提率的同时也减轻的检测人员的强度。)
借助这种定量关系,通过实时定量仪可以绘制出的扩增曲线,该曲线是荧光信号随着循环数变化而变化的曲线,借助该曲线就可以更精确、方便的分析结果,因此该技术被越来越广泛的应用。
定量技术也称为实时荧光定量,是指在反应体系中加入荧光基团使荧光基团与目标产物建立一定的对应关系,利用荧光信号累积实时监测整个进程,通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
实时荧光定量是检测生物样品中DNA、RNA含量的最普遍的方法,通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。
数字是在传统和实时荧光定量基础上发展起来的第三代技术。无需标准品和标准曲线,可实现更灵敏、准确的定量。同时,数字是一种单分子扩增技术,可以有效避免反应抑制剂的影响。随着反应室的增大,反应受抑制剂的影响越来越小。
实时定量荧光即通过实时检测每一个循环扩增产物相对应的荧光信号,来实现对起始模板进行定量及定性的分析,本实验采取荧光染料法,在反应体系中,加入荧光染料,荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与产物的增加完全同步。
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